Total Count of WBC (TLC)
বিভিন্ন অসুখে রক্তে WBC-র পরিমান স্বাভাবিকের চেয়ে কমে যায় আবার কোন কোন অসুখে স্বাভাবিকের চেয়ে বেড়ে যায়। তাই চিকিৎসকগণ রক্তে WBC-র পরিমাণ নির্ণয় করে বিভিন্ন অসুখের উপস্থিতি নির্ণয় করেন।
পরীক্ষা করতে যা যা প্রয়োজন :
1. WBC pipette
2. WBC fluid
3. Improved neubauer chamber.
পরীক্ষা পদ্ধতি:
>> প্রথমে রোগী থেকে রক্ত সংগ্রহ করে WBC pipette এ 0.5 দাগ পর্যন্ত রক্ত নিয়ে, 11 দাগ পর্যন্ত WBC fluid নিতে হবে।
>> ভালভাবে নেড়ে Blood এবং fluid মিশাতে হবে।
>> ৪/৫ মিনিট পর improved neubauer chamber এ উপর special cover slip দিতে হবে।
>> পুনরায় WBC pipette কে ভালভাবে নেড়ে mix করে প্রথম ১/২ ফোঁটা মিশ্রণ ফেলে দিয়ে, ১ ফোঁটা improved neubauer chamber ও special cover slip এর সংযোগ স্থানে এক পাশ দিয়ে দিলে তা chamber এর ভেতর চলে যাবে।
>> ১/২ মিনিট পর Microscope এর 10x Objective দিয়ে দেখতে হবে।
>> Neubauer chamber এর চার কোণে ১৬টি বর্গাকৃতির ঘরে (১৬x৪)=৬৪ বর্গাকৃতির ঘরের মোট WBC-র সংখ্যাকে ৫০ দ্বারা গুণ করলে যে ফল পাওয়া যাবে, তাই হল প্রতি কিউবিক মিলিমিটারে WBC-র পরিমাণ ।
Calculation of WBC/cmm:
Cell counted x Blood dilution x Chamber depth / Area of chamber counted
বা – Cell counted x 20 x 10 / 4
বা – Cell counted x50
(Blood dilution-20, Chamber depth-10, Area of counted-4).
Example:
Improved neubauer chamber এর চার কোণে (4×16=64 ঘরে) 200 টি WBC পাওয়া যায় তাহলে
Number of WBC/cmm :
Cell counted x Blood dilution x Chamber depth / Area of chamber counted
200 x 20 x 10 / 4
=40,000/4
=10,000
বা Cell counted x 50
= 200 x 50
=10,000
WBC Fluid তৈরীর নিয়ম :
Glacial acetic acid —– 1.5 ml
1% Aqueous solution of Gention violet —–1.0 ml
Distilled water—— 100ml
Normal count of WBC:
4000-11000/cmm
14.0-11.0×109/L
WBC count (Micropipette বা Glass pipette এর সাহায্যে):
আমরা WBC pipette ছাড়াও WBC count করতে পারি।
এক্ষেত্রে,
>> Micropipette বা glass pipette এর সাহায্যে একটি test tube বা penicillin এর বোতলে 0.95 ml বা 950ul WBC fluid (Turk solution) নিতে হবে
>> এর সাথে 0.05 ml বা 50ul blood নিয়ে ভালভাবে mix করতে হবে। (now the dilution of the blood is 1 in 20 )
>> ৪-৫ মিনিট অপেক্ষা করতে হবে।
>> পূনরায় mix করতে হবে।
>> এবার এই test tube বা বোতলের মিশ্রণ থেকে one drop মিশ্রণ Improved neubauer chamber এ নিয়ে উপরের পদ্ধতিতে count করতে হবে।