RBC count করতে আমাদের প্রয়োজন হবে:
- RBC pipette
- RBC fluid
- Improved neubauer chamber
পরীক্ষা পদ্ধতি:
>> RBC pipette এর 0.5 দাগ পর্যন্ত রক্ত এবং 101 দাগ পর্যন্ত RBC fluid নিয়ে নেড়ে fluid এবং blood মিশাতে হবে।
>> ৫-১০ মিনিট অপেক্ষা করে তারপর পিপেটটিকে পুনরায় ভালভাবে নেড়ে mix করে, প্রথম ২/৩ ফোঁটা মিশ্রণ ফেলে, ১ ফোঁটা improved neubauer chamber এ দিতে হবে।
>> ১/২ মিনিট পর microscope এ দেখতে হবে।
>> Improved neubauer chamber এর মাঝখানের ছোট ঘরগুলো থেকে চার কোণের (4×16) = 64 টি ঘর এবং মাঝখানের 1×16=16 টি (64+16) মোট 80 টি ঘরের RBC সংখ্যা গুনতে হবে।
>> ৮০ ঘরে মোট যত RBC পাওয়া যায় তাকে 10,000 দিয়ে গুণ করলেই প্রতি cmm এ RBC-র পরিমাণ পাওয়া যায় ।
>> Microscope এ RBC count এর সময় RBC 40 x objective দিয়ে দেখতে হবে।
Calculation of RBC/cmm:
Number of cell counted x Blood dilution x Chamber depth / Area of chamber counted.
বা Number of cell counted x 200 x 10 / 1×5
বা Number of cell counted x 10,000
বা Number of cell counted x 10,000 / 10,00,000 Million
বা (Number of cell counted x 0.01) Million
Calculation of RBC/L:
(Number of cell counted x 0.01) Million x 106
বা (Number of cell counted x 0.01 ) x 106 x 106
বা (Number of cell counted x 0.01) x 1012
Example :
যদি improved neubauer chamber এর মাঝখানের ৫ ঘরে (5×16=80 ঘরে) 400 টি cell পাওয়া যায় তাহলে,
RBC count/cmm:
400x200x10 / 1/5
= 400 x 10,000
= 40,00,000 বা 4.0 million
এবং
RBC count/L:
400 x 0.01 x 1012
= 4.0 x1012
RBC count (Micropipette Glass pipette এর সাহায্যে):
আমরা RBC pipette ছাড়াও RBC count করতে পারি। এক্ষেত্রে,
>> Micropipette বা glass pipette এর সাহায্যে একটি test tube বা penicillin বোতলে 4ml diluting Fluid (RBC Fluid) নিতে হবে
>> এর সাথে 0.02ml বা 20 µl blood নিয়ে ভালভাবে mix করতে হবে।
>> ৪-৫ মিনিট অপেক্ষা করতে হবে।
>> এবার এই Test tube বা penicillin এর বোতলের মিশ্রণ পুনরায় mix করে one drop মিশ্রণ improved neubauer chamber এ নিয়ে উপরের পদ্ধতিতে count করতে হবে।
Normal count of RBC:
Men: 4.5 – 5.5 million/cmm বা 4.5 – 5.5 x 1012/L
Women: 4.0 – 5.0 million/cmm বা 4.0 – 5.0 x 1012/L
RBC Fluid তৈরীর নিয়ম:
Sodium citrate – – – – – 3.0 gm
Formalin – – – – – 1 ml
Distilled water – – – – – 100 ml