Reticulocyte হল RBC-র একটি অপরিপক্ক অবস্থা বা immature type. Reticulocyte নামটি এসেছে Fine network বা Reticulum থেকে যা stain করার পর দৃশ্যমান হয়। রক্তে ১ থেকে ৪ দিনের মধ্যে Reticulocyte nature RBC তে পরিনত হয়। Reticulocyte count করে আমরা দেহে RBC তৈরীর হার সর্ম্পকে জানতে পারি এবং bone marrow-র কার্যক্ষমতা সম্পর্কে ধারনা পেতে পারি। দেহে যদি কোন কারনে দ্রুত RBC নষ্ট হয়ে যায়, RBC কমে যায় তাহলে রক্তে RBC-র চাহিদা বেড়ে যায় এবং এর ফলে bone marrow দ্রুত RBC release করতে থাকে এবং এ অবস্থায় reticulocyte ও bone marrow থেকে release হয়ে রক্তে চলে আসে। এর ফলে Reticulocyte count বেড়ে যায়, যদি কোন রোগীর Anemia থাকে কিন্তু Reticulocyte count normal থাকে তাহলে বুঝতে হবে এই রোগীর bone marrow dysfunction আছে বা এই রোগীর Erythropoietin এর অভাব আছে।
Normal values of Reticulocyte count :
Adult : 0.5 – 2%
Newborn : 3 – 7%
1 Week : 1.8-4.6%
1 Month : 0.1-1.7%
6 Month : 0.7-2.3%
> 6 Month : 0.5 – 1.0%
যে সব কারনে Reticulocyte count বেশী থাকে:
1. Sickle cell anemia
2. Thalassemia major
3. Hemolytic anemia
4. Erythroblastosis fetalis
5. Effective treatment of anemia
6. Pregnancy
যে সব কারনে Reticulocyte কম থাকে:
1. Aplastic anemia
2. Bone marrow depression
3. Cancer
4. Folate deficiency anemia
5. Iron deficiency anemia
6. Pernicious anemia
7. Radiation therapy
8. Cirrhosis of liver
9. Chronic infection
10. Alcoholism
11. Myelodysplasia
12. Myxedema
যে সব কারনে Reticulocyte test ফলাফল ভুল হতে পারে :
1. Hemolysis blood থেকে test করলে।
2. Blood transfusion এরপর test করলে।
3. IV দেয়া অবস্থায় ঐ অঙ্গ থেকে blood নিয়ে test করলে।
4. Epoetin alfa drug গ্রহণের পর AZT ও Chemotherapy গ্রহনের পর test করলে।
Materials & Reagents:
Microscopic slide
Glass spreader
Test tube
Test tube Rack
Funnel.
Filter paper
1% Brilliant crysel blue or
New methylene blue
Reticulocyte count এর জন্য 1% Brilliant crysel blue প্রস্তুতপ্রণালী :
Brilliant crysel blue – – – – – 1.0g
Trisodium citrate (Na3 C6 H5 O7 H2O) – – – – – 0.4g
Sodium Chloride Solution (Nacl ) 0.85% – – – – – 100ml
একটি পরিস্কার পাত্রে নিয়ে ভালভাবে mix করতে হবে। ব্যবহারের পূর্বে filter করে নিতে হবে। তৈরীর পর অন্ধকারে এবং ফ্রিজে রাখতে হবে।
পরীক্ষা পদ্ধতি:
>> একটা test tube এ 2 drops filter করা 1% Brilliant cresyl blue নিতে হবে।
>> একই tube এ 2 drop capillary blood বা venous blood নিয়ে mix করতে হবে। (EDTA মিশ্রিত blood দিয়েও পরীক্ষা করা যায়)
>> 37°C তাপমাত্রায় 10-30 মিনিট রাখতে হবে।
>> পুনরায় tube এর মিশ্রণকে ভালভাবে mix করে one small drop মিশ্রণ দিয়ে একটি thin film তৈরী করতে হবে।
>> Film শুকালে কোন প্রকার stain করা ছাড়া microscope এ 100x এর মাধ্যমে দেখে Reticulocyte count করতে হবে।
>> Reticulocyte গুলো দেখতে mature RBC-র চেয়ে একটু বড় এবং cell গুলোর মাঝখানে ঘন বেগুনী রংয়ের দানাদার (Irregular dark purple granules) বা সুক্ষ সুতার জালের মত (Filamentous net like structure) Ribo-nuclear material দেখতে পাওয়া যাবে।
Reticulocyte গণনা পদ্ধতি:
>> Film এর বিভিন্ন স্থানে কমপক্ষে 500টি RBCদেখতে হবে।
>> 500টি RBC-র মধ্যে কয়টি Reticulocyte পাওয়া যায় তা দেখতে হবে।
>> নিম্নের পদ্ধতিতে Reticulocyte এর (%) হিসাব করতে হবে।
>> Reticulocyte count (%) = Number of Reticulocyte counted x 100 / Number of RBC examined
>> যদি 500 RBC -এর মধ্যে ১০টি Reticulocyte পাওয়া যায় তাহলে,
Reticulocyte count = 10 x 100 / 500
=2%
New Methylene Blue-র মাধ্যমে একই পদ্ধতিতে Reticulocyte count করা যায়।
New Methylene blue কিভাবে প্রস্তুত করতে হবে:
New Methylene blue – – – – – : 0.5 gm
Sodium chloride – – – – – : 0.7gm
Sodium oxalate – – – – – : 0.13 gm
Distilled water – – – – – : 100 ml
Dark reagent bottle এ নিয়ে mix করতে হবে। অন্ধকারে, ফ্রিজে রাখতে হবে। ব্যবহারের পূর্বে filter করে নিতে হবে।
Reticulocyte কেমন দেখা যেতে পারে তার নমুনা ছবি।