Leishmania parasite (Leishmania donovani) হল এক ধরণের protozoa যা visceral leishmaniasis বা kala-azar এর জন্য দায়ী। Sand-fly নামক এক ধরনের মাছি এ পরজীবি ছড়ায়। এ রোগ নির্ণয়ের জন্য spleen থেকে tissue aspirate করে বা bone marrow aspirate করে বা enlarged lymph node থেকে tissue aspirate করে smear তৈরী করে stain করে microscopic examination করে leishmania parasite এর উপস্থিতি নির্ণয় করা হয়।
কখনো কখনো peripheral blood examination করেও leishmania parasite পাওয়া যেতে পারে।
Blood বা বিভিন্ন tissue পরীক্ষা করে leishmania parasite যে intracellular forms এ পাওয়া যায় তাহাকে amastigotes বলা হয়।
Leishmania-র amastigotes এর জন্য blood ছাড়া যে যে specimen aspirate করে পরীক্ষা করা হয়:
- 1. Splenic tissue
- 2. Bone marrow
- 3. Lymph node
পরীক্ষা পদ্ধতি:
>> অভিজ্ঞ doctor/physician দ্বারা সঠিক পদ্ধতিতে splenic tissue বা bone marrow বা lymph node collection করতে হবে।
>> Collection এর সাথে সাথে পরিস্কার microscopic slide এ aspirate material পাতলা করে ছড়িয়ে smear তৈরী করতে হবে।
>> Smear air dry করতে হবে।
>> Smear absolute methanol এ 2-3 minutes fix করতে হবে।
>> Smear giemsa stain এর সাহায্যে stain করতে হবে। (malarial parasite
>> এর film যে পদ্ধতিতে stain করা হয় একই পদ্ধতিতে।)
>> Stain করে শুকানোর পর smear এর উপর immersion oil দিয়ে microscope এর 100x objective এ দেখে leishmania-র amastigotes এর উপস্থিতি নির্ণয় করতে হবে।
>> Microscopic examination এ leishmania-র amastigotes গুলো 2-4µm ছোট গোলাকার বা ডিম্বাকৃতির দেখা যাবে। Amastigotes গুলো monocytes এর ভেতর কয়েকটি একসাথে দেখা যেতে পারে। কখনো কখনো macrophage এর ভেতর বা দুই cell এর মাঝখানেও পাওয়া যেতে পারে।
Kala-azar diagnosis এর জন্য় বর্তমানে microscopic examination ছাড়াও নিম্ন লিখিত test গুলো করে Kala-azar রোগ নির্ণয় সম্ভব:
- ICT for Kala-azar (strip বা device use করে)
- Katex (latex agglutination test)
- DAT (direct agglutination test)
- Aldehyde test (non specific test)
- CFT (complement fixation test)
- ELISA
- IFAT (immunofluorescent antibody test)
- PCR (Polymerase Chain Reaction)