Clinical Pathology
Urine Examination :
Urine Routine Examination এ সাধারনত তিন ধরনের Examination করা হয়:
- Physical Examination
- Colour
- Appearance
- Sediment
- Specific Gravity
- Chemical Examination
- Sugar/Glucose
- Protein, mainly Albumin
- Bilirubin
- Urobilinogen
- Nitrate
- Microscopic Examination
- Epithelial Cells
- Pus Cells
- RBC
- Casts : RBC casts, WBC cast, Hyaline cast
- Crystals : Calcium oxalate, Triple Phosphate,
Composition of urine :
- Water 95%,
- Solid 5%
- Organic substance : Urea, uric acid, creatinine, creatine, ammonia.
- Inorganic substance : Chloride, calcium, magnesium, phosphorus
Collection of Urine :
- একটি clean container এ সকালের প্রথম fresh mid stream urine সংগ্রহ করা উচিত।
- পরিমাণ হতে পারে 10-20ml.
- উক্ত container এ patient এর sex, identity number, date and time of collection lebel করা থাকবে।
Toluene is the most Common and suitable preservative of urine .
Types of urine specimen : two types
- Single specimen ( সাধারনত Routine examination and qualitative chemical test এর জন্য Single specimen সংগ্রহ করা হয়।).
- 24 hour specimen (Quantitative test এর জন্য প্রয়োজন। যেমন, CCR, 24 hours Urine Total Protein.)
Indication for Urine Examination :
- For the diagnosis of renal disorder
- For the diagnosis of pregnancy, parasitic infection, jaundice, drug overdose
- For the diagnosis of endocrine disorder. E.g. hormonal problem, diabetes.
Some important clinical terms of urine:
- Polyuria :
২৪ঘন্টায় 2500 ml এর বেশি Urine ত্যাগ করলে সেই condition কে polyuria বলে।
Causes of Polyuria : Diabetes mellitus, Diabetes insipidus, Excess Intake water, Cold weather.
- Oliguria :
২৪ ঘন্টায় 400 ml এর কম Urine ত্যাগ করলে সেই condition কে Oliguria বলা হয়।
Causes of Oliguria : Diarrhoea, Fever, Less water intake, Hypertension.
- Anuria :
২৪ ঘন্টায় 100 ml এর কম পরিমাণ Urine ত্যাগ করলে সেই condition কে anuria বলা হয়।
Causes of Anuria : Cardiac failure, Acute renal failure, Severe diarrhoea, Vomiting.
- Haematuria :
The presence of blood in urine is called Haematuria.
Cause:- Haemophilia, sickle cell anaemia, renal calculi, renal tuberculosis, pyelonephritis, urethritis.
- Proteinuria :
Proteinuria is a clinical condition in which an increased amount of proteins appear in urine.
Cause:- Nephrotic syndrome, Nephritic syndrome, Infection, Pyelonephritis, Severe urinary tract infection.
- Massive proteinuria :
This is a clinical condition when an abnormal marked high amount of protein appears in urine (>3.5 gm/day)
Cause:- Acute Glomerulonephritis, chronic severe glomerulonephritis, nephrotic syndrome, nephritic syndrome.
- Ketonuria :
Presence of ketone bodies in urine is known as ketonuria.
- Ketone bodies : Acetone, Acetoacetic acid and Beta hydroxy butyric acid are grouped together known as Ketone bodies.
Cause:- Diabetes mellitus, starvation, persistent vomiting.
- Glycosuria :
Presence of glucose in urine is called glycosuria
Cause:- Diabetes mellitus, alimentary glycosuria, pregnancy, renal glycosuria, severe burns.
Urine Glucose Test :
Urine এ glucose এর উপস্থিতি নির্ণয় করার জন্য দুই রকম test আছে ।যথা-
- Qualitative test (Two Methods)
- Benedict’s test
- Reagent Strip Test
- Quantitative test (সাধারনত করা হয় না)
Benedict’s test :
একটি test tube এ 5ml Benedict’s qualitative reagent নেওয়া হয়। Reagent টি কে প্রথমে তাপ দিয়ে দেখে নেওয়া হয় purity (Reagent ঠিক আছে কি না) যাচাই করার জন্য। এরপর এর সাথে ৮ drops urine যোগ করা হয়. Flame এ ২ মিনিট তাপ দেওয়া হয়। তারপর ঠান্ডা করা হয়। Test tube এ Benedict’s solution এর colour এর পরিবর্তন লক্ষ্য করা হয়।
Result :
Blue colour এর কোনো পরিবর্তন নাই : Negative
Green colour : (+)
yellow colour : (++)
Orange colour : (+++)
Brick red colour : (++++)
Reagent Strip Test : Strip ব্যবহার করে Glucose Test করা হয়।
N.B.
Glucose Test জন্য Reagent Strip Test Specific কারন Benedict’s Test এ সব ধরনের Sugar (Glucose, Fructose, Galactose, Sucrose) এর উপস্থিতি দেখা হয় কিন্তু Strip Test এ শুধুমাত্র Glucose এর উপস্থিতি দেখা হয়।
Glucose /Sugar /Reducing substances :
Reducing substances : বলতে সকল প্রকার substances কে বোঝায় যারা Benedict’s solution কে reduce করে।
এরা ২ প্রকার
- Sugar : Glucose, Lactose, Fructose, Galactose.
- Non sugar : Cephalosporin, Nalidixic acid, Uric acid, Ascorbic acid, Glucuronic acid, Hyaluronic acid.
Urine Albumin Test :
Urine albumin 4 ভাবে করা যায় –
- Heat Coagulation Test/Boiling Test.
- By using urine strip
- Sulpho- salicylic acid method
- Nitric acid method
Heat Coagulation Test :
প্রয়োজনীয় যন্ত্রপাতি :
- Test tube
- Test tube holder
- Spirit lamp
- 5% Acetic acid
- Sample (Supplied Urine)
Procedure of Heat Coagulation Test :
- একটা পরিষ্কার Test tube এর ২/৩ অংশ Urine দিয়ে পূর্ণ করতে হবে।
- এই Test tube এর উপরের অংশে Spirit lamp এর সাহায্যে Heat দিতে হবে।
- যদি উপরের অংশে ঘোলাটে ভাব (Cloudiness) দেখা য়ায় তাহলে কয়েক Drops 5% Acetic acid যোগ করতে হবে।এতে যদি আরোও বেশি ঘোলাটে হয় তাহলে এটি Albumin এর উপস্থিতি নির্দেশ করে।
- আর যদি কয়েক Drop 5% Acetic acid যোগ করার পর ঘোলাটে ভাব হারিয়ে যায় (Vanished Cloudiness) তাহলে এটি Excess of phosphate এর উপস্থিতি নির্দেশ করে।
Result :
Cloudiness | Interpretation |
Absent | Nil |
A visibility at dark background | Trace |
Distinctly Cloudy | (+) |
Granular Appearance | (++) |
Large granules | (+++) |
Heavy coagulation that precipitates at the bottom | (++++) |
Urine Drug marker tests :
The test by which presence of abnormal drugs in the body can be detected is called drug marker test.
- Opiates (Gaja)
- Cannabinoids(Fancidil)
- Morphine
- Pethidine (Injection)
- Heroin
Examination of stool :
Physical Examination :
- Quantity
- Colour
- Consistency
- Odor
- Mucus
- Blood
Chemical Examination :
- Reaction
Microscopical examination of stool :
এর মাধ্যমে Stool এ নিম্ন উল্লেখিত Finding পাওয়া যেতে পারে-
- Remnants of food : Vegetable fibre, Vegetable cell, Starch granules, Muscle fibre, Fat globules.
- Epithelial cell
- Pus cell
- Red blood cell (RBC)
- Macrophage
- Protozoa : Tropozoit & Cyst of Giardia intestinalis, Entamoeba histolytica
- Helminths : Ova & larva of Ascaris lumbricoides(AL), Trichuris trichiura, Ankylostoma duodenale (AD – পায়ের তলা দিয়ে প্রবেশ করে), Enterobious vermicularis, Taenia saginata.
- Yeast and moulds.
- Charcoat Leyden crystal
Stool sample এর জন্য সুবিধা জনক Transport media হচ্ছে, Alkaline peptone water : Vibrio এর ক্ষেত্রে। Cary and Blair media : Salmonella, Shigella র ক্ষেত্রে। |
Stool এ ২ রকম form এ blood যেতে পারে :
- Fresh blood : Lower gut থেকে bleeding হলে stool এ blood যেতে পারে : যেমন : Dysentery, Bleeding piles, Ulcerative colitis, Malignant disease.
- Altered blood : Upper gut থেকে bleeding হলে stool এ altered blood যেতে পারে। যেমন : Bleeding peptic ulcer, Hook worm infestation, Typhoid ulcer, Malignant ulcer.
Melaena :
Melaena is the passage of black Tarry stool due to the presence of altered blood. In melaena the OBT test of stool is positive.
Cause:- Hookworm infestation, esophagitis, gastritis, carcinoma of stomach, carcinoma of oesophagus, peptic ulcer, typhoid ulcer, tuberculosis.
OBT of Stool (Occult Blood Test) :
The chemical test to detect presence of blood especially in the stool that is not visible macroscopically is called occult blood test.
Indication :– Piles, Fistula, IBS, Ulcerative colitis.
Occult blood শনাক্ত করার পদ্ধতি :
Chemical method.
- Orthotolidine test
- Benzidine test
- Guaiac acid test
Preparation of patient for OBT :
- Specimen collection এর ৭২ ঘন্টা পূর্ব থেকে patient meat free খাবার খাবে
- Patient কোন iron containing medicine, Barium sulphate, Aspirin অথবা vitamin জাতীয় ঔষধ খাবেনা।
- Patient এর খাবারে আপেল, কমলা ও অন্যান্য citrus food থাকবে না।
- Patient জোরে ঘসা দিয়ে দাঁত ব্রাশ করবে না (দাঁত ব্রাশ করতে যেন রক্তপাত না হয়)
Orthotolidine test :
Principle :
Blood এর Haemoglobin যখন H2O2 এর Contact এ আসে তখন Oxygen তৈরি হয়। উক্ত oxygen, Orthotolidine এর সাথে বিক্রিয়া করে এবং Blue colour তৈরি করে।
Reagents : Orthotolidine solution ও 20 ml H2O2.
Procedure :
- একটি test tube এ অল্প কয়েক ml Stool suspension নিয়ে boil করা হয় ৫ মিনিট এবং ঠান্ডা করা হয়।
- অপর একটি Test tube এ 4 (Four) drop Orthotolidine এবং 1 (One) drop H2O2 নেওয়া হয় এবং এক মিনিট অপেক্ষা করা হয়. উক্ত test tube 1 (One) drop stool suspension যোগ করা হয়।
- এক মিনিটের মধ্য Green অথবা Blue colour আবির্ভূত হলে Test হবে Positive.
Conditions where OBT may be positive :
Bleeding peptic ulcer disease, Parasitic infestation , Carcinoma of stomach /colon, Ulcerative colitis, Typhoid ulcer.
Examination of Sputum :
Sputum:
Sputum is the material coughing up from the lungs, the bronchi, the trachea and the larynx.
Composition of Sputum :
- Water 95%
- Solid 5% : Carbohydrate, Protein, Lipid and DNA. এছাড়াও Mucus, Blood, Pus, Micro-organism উপস্থিত থাকতে পারে।
Collection procedure of Sputum:
- patient কে একটি dry, Clean, wide mouth leakproof container দেওয়া হয়।
- সকালে ঘুম থেকে ওঠার পর এবং কোন mouthwash নেওয়ার পূর্বে sputum (First Cough) সংগ্রহ করা উচিত।
- Patient কে অনুরোধ করার মাধ্যমে deep cough নেওয়ার মাধ্যমে sputum এর specimen সংগ্রহ করতে হবে।Specimen টি অবশ্যই Sputum হতে হবে Saliva নয়।
Sputum-এর ২ রকম Examination করা হয়।
- Physical examination
- Microscopic examination
Pathogens found in Sputum : Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae.
Haemoptysis:It is the expectoration of blood that arises from larynx, trachea, bronchus, lungs. Causes of Haemoptysis : Pulmonary tuberculosis, pulmonary oedema, bronchogenic carcinoma, pulmonary infarction. |
Semen Analysis :
Semen হচ্ছে একপ্রকার fluid যা male Sexual act- এর সময় ejaculated হয়।
Semen Analysis পরীক্ষায় যা যা করা হয় :
- Physical Examination :
- Volume
- Colour
- Odour
- Viscosity
- Chemical Examination
- Reaction:
- Microscopic Examination
- Sperm count
- Motility of Sperm
- Morphology of Sperm
- RBC, Pus Cell, Epithelial cell.
Composition of Semen:
- Sperm
- Seminal fluid
- Prostatic fluid
- Buffers
- Hyaluronidase
Indication of Semen analysis :
- Male infertility নির্ণয় করা।
- Medico-legal উদ্দেশ্য-( সন্দেহজনক -rape case)
- Vasectomy – এর কার্যকারিতা তদন্তের উদ্দেশ্যে।
Collection procedure of semen :
- Semen সংগ্রহের পূর্বে ৩-৫ দিনের মত patient কে sexual contact থেকে বিরত থাকতে হবে।
- Sample সংগ্রহের আদর্শ স্থান হচ্ছে Laboratory – র নিকটে room এ। এর privacy তে masturbation প্রক্রিয়াতে / স্ত্রীর সাথে Intercoarse এর মাধ্যমে সংগ্রহ করতে হবে। কোন lubricant বা condom ব্যবহার করা যাবে না।
- Wide-mouth, clean and dry, plastic disposable container – এ semen সংগ্রহ করা উচিত।
- সংগ্রহের পর sample কে laboratory -র Incubator -এ 37°c তাপমাত্রায় রাখতে হবে (৩০ মিনিট) যতক্ষণ Liquefaction সংঘঠিত না হয়। Liquefaction সংঘঠিত হওয়ার পরপরই Sample পরীক্ষা করা উচিত।
Some terms of Semen analysis :
- Normozoospermia : যখন semen এ sperm count 40-100 million/ml সেই condition কে Normozoospermia বলে।
- Oligospermia : Semen-এ Sperm count 40 million/ml-এর কম হলে সেই condition কে Oligospermia বলে।
- Azoospermia : Semen-এ Sperm-এর অনুপস্থিতি কে azoospermia বলে।
- Necrozoospermia : Semen- এ সকল sperm,dead (non- motile) হলে তাকে Necrozoospermia বলে।
- Hyper Zoospermia : Semen-এ sperm count 125 million /ml-এর বেশি হলে, সেই condition কে hyper zoospermia বলে।
- Hemospermia : Semen-এ উপস্থিত Spermatozoa- র সাথে অনেক RBC, pus cell উপস্থিত থাকলে সেই condition কে hemospermia বলে।