ASO (Latex agglutination method)
ASO বলতে বুঝায় Anti Streptolysin – O
Reagent: ASO Latex reagent
Specimen: Serum
Reagent stability: 2-8°c এ রাখলে expiry date পর্যন্ত ভাল থাকে।
Test procedure(পরীক্ষা পদ্ধতি):
>> Reagent এবং serum প্রথমে রুম তাপমাত্রায় আনতে হবে।
>> একটি পরিষ্কার slide এর একটি circle এ 1 drop ASO latex reagent নিতে হবে। (reagent নেয়ার পূর্বে ভালভাবে mix করে নিতে হবে)
>> এবার reagent এর drop এর পাশে one drop (50µl) serum দিতে হবে এবং একটি পরিষ্কার কাঠির সাহায্যে reagent ও serum ভালভাবে mix করতে হবে।
>> Lab. rotator এ 100rpm এ ২ মিনিট ঘুরাতে হবে।
>> ২ মিনিট ঘুরানোর পর পর্যাপ্ত আলোতে দেখতে হবে agglutination হয়েছে কি না।
Result (ফলাফল):
যদি কোন agglutination না হয় তাহলে ASO less than 200 iu/ml.
যদি agglutination হয় তাহলে ASO 200 iu/ml বা এর বেশী আছে। Agglutination হলে পুনরায় serum কে normal saline দ্বারা dilution করে নিম্নের পদ্ধতিতে পরীক্ষা করে ASO-র সঠিক পরিমাণ নির্ণয় করতে হবে।
Serum dilution করে পরীক্ষা পদ্ধতি:
>> একটি test tube এ one drop normal saline এর সাথে one drop serum নিয়ে mix করতে হবে। এই মিশ্রণ থেকে one drop একটি slide এর একটি circle এর মধ্যে নিতে হবে। এর সাথে one drop ASO latex reagent দিতে হবে। পরিষ্কার কাঠির সাহায্যে mix করতে হবে। Lab. rotator এ 100rpm এ ২ মিনিট ঘুরাতে হবে। Agglutination হলে ASO: 400 iu/ml.
>> একটি test tube এ two drops normal saline নিতে হবে। এর সাথে one drop serum দিতে হবে। ভালভাবে mix করে একটি slide এর একটি circle এ one drop মিশ্রণ নিতে হবে। এর সাথে one drop ASO latex reagent দিতে হবে। mix করে ২ মিনিট 100rpm এ Lab. rotator এ ঘুরাতে হবে। Agglutination হলে ASO: 600 iu/ml.
>> একটি test tube এ 3 drops normal saline এর সাথে one drop serum নিয়ে mix করে উপরের নিয়মে ASO-র reagent দিয়ে পরীক্ষা করলে যদি agglutination হয় তাহলে ASO: 800 iu/ml.
>> একটি test tube এ 4 drops normal saline এর সাথে one drop serum মিশিয়ে উপরের নিয়মে ASO-র reagent দিয়ে পরীক্ষা করলে যদি agglutination হয় তাহলে ASO: 1000 iu/ml.
>> একটি test tube এ 5 drops normal saline + 1 drop serum mix করে one drop মিশ্রণ নিয়ে ASO-র reagent দিয়ে test করলে যদি agglutination হয় তাহলে ASO: 1200 iu/ml.
>> একটি test tube এ 6 drops normal saline + 1 drop serum mix করে one drop মিশ্রণ নিয়ে পরীক্ষা করলে যদি agglutination হয় তাহলে ASO: 1400 iu/ml.
>> একই ভাবে 9 drops normal saline + 1 drop serum mix করে one drop মিশ্রণ নিয়ে ASO-র reagent দিয়ে test করলে যদি agglutination হয় তাহলে ASO: 2000 iu/ml.
Normal value: 200 iu/ml
Serum dilution করে ২য় পরীক্ষা পদ্ধতি:
>> একটি পরিষ্কার slide নিতে হবে।
>> Slide এর ৫টা circle এর প্রত্যেকটিতে 1 drop normal saline (50µl) নিতে হবে।
>> প্রথম circle এ one drop serum (50µl) নিতে হবে। serum + normal saline ভালভাবে mix করে প্রথম circle থেকে one drop ২য় circle এ দিতে হবে।
>> ২য় circle এর normal saline এর সাথে প্রথম circle থেকে নেয়া drop ভালভাবে mix করে ২য় circle থেকে one drop ৩য় circle এ নিতে হবে।
>> ৩য় circle এর normal saline এর সাথে ২য় circle থেকে নেয়া drop ভালভাবে mix করে one drop চতুর্থ circle এ নিতে হবে।
>> ৪র্থ circle এর normal saline এর সাথে ৩য় circle থেকে নেয়া drop ভালভাবে mix করে one drop ৫ম circle এ নিতে হবে।
>> ৫ম circle এর normal saline এর সাথে ৪র্থ circle থেকে নেয়া drop ভালভাবে mix করে one drop ফেলে দিতে হবে।
>> এবার ১ম circle এ one drop ASO latex reagent দিয়ে test করলে যদি agglutination হয়, তাহলে ASO: 400 iu/ml
>> ২য় circle এ one drop ASO latex reagent দিয়ে test করলে যদি agglutination হয়, তাহলে ASO: 800 iu/ml
>> ৩য় circle এ one drop ASO latex reagent দিয়ে test করলে যদি agglutination হয়, তাহলে ASO: 1600 iu/ml
>> ৪র্থ circle এ one drop ASO latex reagent দিয়ে test করলে যদি agglutination হয়, তাহলে ASO: 3200 iu/ml
>> ৫ম circle এ one drop ASO latex reagent দিয়ে test করলে যদি agglutination হয়, তাহলে ASO: 6400 iu/ml.